CODICE 91080 ANNO ACCADEMICO 2017/2018 CFU 2 cfu anno 2 BIOLOGIA MOLECOLARE E SANITARIA 9015 (LM-6) - SETTORE SCIENTIFICO DISCIPLINARE BIO/16 LINGUA Inglese SEDE PERIODO 2° Semestre OBIETTIVI E CONTENUTI OBIETTIVI FORMATIVI "The course of Protein engineering is composed of two parts. The first part is designed to provide students with a basic understanding of the methods used to build expression constructs for the production of modified proteins. The second part describes methods to engineer antibodies used for therapeutic purpose." OBIETTIVI FORMATIVI (DETTAGLIO) E RISULTATI DI APPRENDIMENTO Lo scopo del corso è quello di fornire agli studenti conoscenze sui presupposti e sulle tecniche alla base dell’ingegneria delle proteine e degli anticorpi. Verranno inizialmente presentati alcuni concetti di base relativi alla produzione di proteine ricombinanti. Quindi, verranno analizzati i diversi approcci per ottenere proteine modificate e/o ottimizzate per le diverse applicazioni, le tecniche impiegate e i sistemi di selezione/screening. Per quanto riguarda l’ingegneria degli anticorpi verranno forniti elementi sia sulla struttura tridimensionale che sulla genetica delle immunoglobuline. Successivamente verranno affrontate le diverse tecniche di umanizzazione degli anticorpi e verranno descritte le diverse tipologie di anticorpi ricombinanti. MODALITA' DIDATTICHE Lezioni frontali PROGRAMMA/CONTENUTO Vettori d’espressione batterica ed eucariotica. Principali vettori d’espressione batterica. Sistemi di espressione in procarioti. Sistemi di espressione “cell-free”.Vettori d’espressione eucariotica: come sciegliere? Vettori bicistronici. Vettori per proteine di fusione. Vettori per il tagging. Sistemi inducibili. Sistemi di clonaggio alternativi. Come creare vettori custom. Sistemi di espressione in eucarioti: lieviti, cellule di insetto e di mammifero. La struttura delle immunoglobuline, il dominio immunoglobulinico, regioni CDR e FR, l’antigen binding site, la regione costante delle immunoglobuline, cenni sulla genetica delle immunoglobuline. Anticorpi in terapia: dai monoclonali umani agli anticorpi umani. Gli anticorpi monoclonali, gli anticorpi chimerici, tecniche di umanizzazione degli anticorpi: CDR/SR grafting, resurfacing, superhumanization. Produzione di anticorpi umani in topi transgenici. Immunogenicità degli anticorpi a scopo terapeutico.Anticorpi in formati alternativi: frammenti scFv, proteine di fusione scFV-Fc, piattaforme di display anticorpale, anticorpi ricombinanti derivanti da camelidi (nanobodies). TESTI/BIBLIOGRAFIA Non sono al momento disponibili testi adeguati. Oltre agli appunit delle lezioni gli studenti avranno a disposizione del materiale didattico sotto forma di dispense e pubblicazioni dalla letteratura scientifica. DOCENTI E COMMISSIONI FABIO GIUSEPPE GHIOTTO Ricevimento: Il docente è sempre disponibile al ricevimento degli studenti, compatibilmente con i propri impegni professionali e previo appuntamento tramite email (fghiotto@unige.it) LEZIONI INIZIO LEZIONI Secondo semestre Orari delle lezioni L'orario di questo insegnamento è consultabile all'indirizzo: Portale EasyAcademy ESAMI MODALITA' D'ESAME Oral exam
