OBIETTIVI FORMATIVI

Il corso permette di conoscere ed applicare le principali tecniche di allestimento di colture cellulari

OBIETTIVI FORMATIVI (DETTAGLIO)

Fornire agli studenti un adeguato approfondimento delle tecniche utilizzate per la crescita e la manipolazione di cellule "in vitro" e sull'utilizzo dei diversi tipi di coltura cellulare

MODALITA' DIDATTICHE

Lezioni frotnali

Esercitazioni in laboratorio

PROGRAMMA/CONTENUTO

Colture primarie e Linee cellulari finite e continue: ottenimento e mantenimento. Disaggregazione dei tessuti. Separazione e caratterizzazione di specifici tipi cellulari presenti in un tessuto.
Linee cellulari stabilizzate e/o immortalizzate.

Metodi di Coltura di cellule. Vantaggi e svantaggi delle colture cellulari. Equipaggiamento di laboratorio: tecniche asettiche. Misure di sicurezza, rischi associati all'utilizzo di organismi geneticamente modificati. L'ambiente delle colture: substrati, medium di coltura, temperatura, fattori di crescita, tipi di siero e additivi chimici ecc. Adesione cellulare. Crescita su substrati specifici (polilisina, poliornitina, collagene). Cinetiche di crescita.
 Conta cellulare. Metodi di valutazione della proliferazione cellulare, sopravvivenza e tossicità. Test di vitalità. Principali contaminanti. Crioconservazione. Tecniche di trasfezioni cellulari per lo studio dell'espressione genica e per l'analisi di proteine. Trasfezioni temporanee e stabili.

Confluenza e subcoltivazione.

I due crediti di Laboratorio saranno dedicati all'applicazione pratica di quanto spiegato durante le lezioni teoriche (allestimento di una coltura, conta cellulare, subcoltivazione, colorazioni, reazioni immunocitochimiche,..)

TESTI/BIBLIOGRAFIA

- G.L. Mariottini et al. Introduzione alle colture cellulari: metodiche relative – MORGAN ed. tecniche

A disposizione (scaricabili da Aula WEB) copia delle diapositive utilizzate a lezione e durante i laboratori.