OBIETTIVI FORMATIVI

L'insegnamento si propone di far conoscere e sperimentare allo studente le più importanti tecniche elettrofisiologiche ovvero la tecnica del patch-clamp, nelle sue varianti più utilizzate, e la tecnica del voltage-clamp a doppio microelettrodo (TECV) applicata ad ovociti di Xenopus. Nel corso verranno approfonditi gli aspetti teorici relativi e verranno presentate le caratteristiche funzionali e strutturali delle principali famiglie di canali ionici e trasportatori elettrogenici presenti sia sulla membrana plasmatica che sulle membrane intracellulari.

OBIETTIVI FORMATIVI (DETTAGLIO) E RISULTATI DI APPRENDIMENTO

La frequenza e la partecipazione attiva alle attività formative proposte (lezioni frontali e attività in laboratorio) e lo studio individuale consentiranno allo studente di:

- conoscere gli aspetti teorici e sperimentali dell’espressione eterologa di canali ionici e trasportatori in ovociti di Xenopus e della relativa tecnica del voltage-clamp a doppio microelettrodo (TECV);

- conoscere gli aspetti teorici e sperimentali della tecnica del patch-clamp.

MODALITA' DIDATTICHE

Lezioni frontali e attività di laboratorio.

Per il primo semestre, le lezioni saranno effettuate possibilmente in presenza, garantendo comunque la fruizione delle lezioni anche a distanza, mediante videoregistrazione, sincrona o asincrona. Le esercitazioni di laboratorio saranno organizzate possibilmente in presenza, eventualmente con più turni. Tutte le attività in presenza saranno effettuate nel rispetto dei limiti di capienza delle aule/laboratori e del distanziamento, previsti dalla normativa vigente a seguito dell'emergenza COVID19.

Si rimanda all'istanza AulaWeb specifica dell'insegnamento per eventuali aggiornamenti a causa di variazioni della situazione sanitaria ed epidemiologica.

PROGRAMMA/CONTENUTO

Elementi di elettrofisiologia: costanti fondamentali, resistenza e capacità di membrana. Gli ioni in soluzione acquosa: equazione di Nernst. Meccanismi di funzionamento di canali e trasportatori. Il potenziale di membrana: iperpolarizzazione e depolarizzazione. Che cosa è il voltage-clamp. La teoria della tecnica del patch-clamp. Principali famiglie di canali ionici e trasportatori. Attività di laboratorio: la tecnica TECV e la tecnica del patch-clamp.

TESTI/BIBLIOGRAFIA

- Kandell et al. Principi di neuroscienze. Quarta edizione sulla quinta edizione inglese, Casa Editrice Ambrosiana

- Hille B (2001) Ion Channels of Excitable Membranes, Third Edition. Oxford University Press