OBIETTIVI FORMATIVI (DETTAGLIO) E RISULTATI DI APPRENDIMENTO

Acquisire conoscenze e abilità pratiche legate a tecniche di biologia molecolare, tecniche immunoematologiche, immunoistochimche, cromatografiche e citofluorimetriche.

MODALITA' DIDATTICHE

Attività di apprendimento delle tecniche di Laboratorio di base con frequenza obbligatoria del 100% delle ore pianificate dei Laboratori e apprendimento diretto attraverso l'utilizzo di strumentazioni con la guida di professionisti appartenenti allo stesso Profilo Professionale. Non sono previste ore di studio individuale.

PROGRAMMA/CONTENUTO

Settore citofluorimetria o cromatografia 105 h:

Citofluorimetria

• Conoscenza delle basi fisiche e tecnologiche della citometria a flusso: schema generale di un citofluorimetro (fluidica, ottica, elettronica); significato dei parametri fisici cellulari valutati in citometria; segnali di fluorescenza; descrizione dei fluorocromi; operazione di compensazione; significato di analisi multiparametrica; strategia di gating; rappresentazione dei dati
• Tecniche di colorazione diretta e indiretta di campioni biologici
• Principali metodologie applicative per lo studio del fenotipo e delle funzioni linfocitarie, quali produzione di citochine e proliferazione

Cromatografia

• Dimostrazione e caratteristiche del funzionamento dei moduli di un HPLC
• Estrazione di un campione su colonna di resina
• Utilizzo delle S.I. in diverse metodiche
• Lettura di un cromatogramma e eventuali modifiche sulla ritenzione dei tempi di uscita dei picchi
• Intervento sul programma di lettura per evidenziare e riconoscere le varie operazioni affinchè venga riconosciuta una sostanza in fase analitica
• Esercitazione sulle varie metodiche in fase di eluizione di un campione
• Procedimento per stabilizzare una colonna ed identificazione delle varie colonne su un modulo HPLC
• Dimostrazione e funzionamento di un LC-MS/MS; estrazione di un campione per analisi in LC-MS/MS
• Valutazione di una curva di calibrazione di analisi in LC-MS/MS

Settore immunoematologia  140 h:

• Gruppo sanguigno su adulti; Gruppo sanguigno + TCD su neonati
• Esecuzione fenotipo Rh
• Esecuzione test di ricerca “D” debole
• Test di Coombs diretto/frazionato; Test di Coombs indiretto
• Ricerca ed identificazione anticorpi antieritrocitari
• Eluizione di autoanticorpi
• L’automazione in immunoematologia;
• Ruolo ed attività di un TSLB in un SIT
• Emovigilanza e sicurezza
• Reazioni avverse

Settore biologia molecolare 175 h:

• Organizzazione aree e norme comportamentali nel laboratorio di biologia molecolare
• Estrazione acidi nucleici con metodiche manuali ed automatiche in uso nel laboratorio
• Dosaggio e valutazione qualità acidi nucleici
• Tecniche di PCR, GEL elettroforesi
• Sequenziamento
• Interpretazione risultati
• Manutenzione e uso  strumenti di laboratorio
• Controlli di qualità CQI e VEQ

Settore anatomia patologica  140 h:

• Tecniche immunoistochimiche
• Trattamento preparatorio del materiale per esami immuno-istochimici
• Tecniche immunoistochimiche di base (manuali, semi-automatiche e automatiche)
• Principali markers in immuno-istochimica (lettura data-sheet, diluizione ottimale anticorpo nuovo, ecc)
• Utilizzo dei controlli positivo e negativo
• Preparazione tamponi; manutenzione e gestione strumenti
• Immuno-istochimica su materiale citologico
• Allestimento preparati per diagnostica estemporanea- Colorazioni di elezione per esami intraoperatori - allestimento di citologici per esame intraoperatorio 
• Tecniche di ibridazione in situ (FISH –CISH-SISH); tecniche manuali, semi-automatiche, e automatiche
• Trattamento preparatorio del materiale per analisi FISH (istologico, citologico, decolorato, sangue periferico, aspirato midollare)
• Principali tipi di  sonde lettura del data sheet e messa a punto delle metodiche per nuovi reattivi
• Utilizzo dei controllo (sonda con controllo interno); manutenzione e gestione strumenti.
• Valutazione al microscopio dei preparati eseguiti e della loro adeguatezza, eventuali modifiche da apportare