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TECNOLOGIE DEL DNA RICOMBINANTE E LABORATORIO

CODICE 94710
ANNO ACCADEMICO 2022/2023
CFU
  • 7 cfu al 2° anno di 8756 BIOTECNOLOGIE (L-2) - GENOVA
  • SETTORE SCIENTIFICO DISCIPLINARE BIO/11
    LINGUA Italiano
    SEDE
  • GENOVA
  • PERIODO 2° Semestre
    PROPEDEUTICITA
    Propedeuticità in ingresso
    Per sostenere l’esame di questo insegnamento è necessario aver sostenuto i seguenti esami:
    • BIOTECNOLOGIE 8756 (coorte 2021/2022)
    • BIOLOGIA E GENETICA 80754
    MATERIALE DIDATTICO AULAWEB

    PRESENTAZIONE

    Il corso presenta una panoramica delle moderne tecnologie del DNA ricombinante per fornire agli studenti gli strumenti conoscitivi sia teorici che pratici fondamentali delle biotecnologie molecolari, con particolare attenzione alla parte sperimentale e all'acquisizione di manualità nell'utilizzo della strumentazione di un laboratorio di biologia molecolare.

    OBIETTIVI E CONTENUTI

    OBIETTIVI FORMATIVI

    Il corso si propone di fornire allo studente una appropriata preparazione nella scelta, nella programmazione e nell’utilizzo delle principali tecniche e tecnologie della moderna ingegneria genetica. Grazie al significativo numero di ore di Esercitazioni di Laboratorio durante il corso lo studente ha l’opportunità di ottenere una valida preparazione pratica nell’esecuzione delle tecniche insegnate nei moduli di lezione frontale.

    OBIETTIVI FORMATIVI (DETTAGLIO) E RISULTATI DI APPRENDIMENTO

    Lo studente verrà introdotto alla conoscenza di:

    -tecniche del DNA ricombinante: cenni storici, metodologie

    -Enzimi di restrizione e legatura del DNA

    - Vettori e plasmidi

    -Clonaggio in E. coli e applicazioni in eucarioti

    - Librerie geniche, sonde molecolari, marcatura del DNA

    -Elettroforesi del DNA, rivelazione, dosaggio spettrofotometrico

    - Southern Blot, Northern Blot, applicazioni nel DNA fingerprinting

    -Tecniche di ibridazione, microarray e RNA interference

    -La PCR, progettazione ed esecuzione. Individuazione di possibili difficoltà e punti critici.

    -Usi della PCR nelle tecniche di clonazione molecolare, casi particolari di PCR

    - Sequenziamento degli acidi nucleici, principi e principali tecniche in uso.

    - Produzione di proteine ricombinanti; principali tecniche in uso.

    -Studi di interazione proteina:proteina; Il doppio ibrido in lievito.

    - Studi di interazione proteina:proteina; principali tecniche in uso.

    -La GFP come reporter. Descrizione dei principali campi di utilizzo.

    -Principali geni reporter e tecniche di transfezione.

    PREREQUISITI

    conoscenze di base bi biologia, chimica fisica e matematica

    MODALITA' DIDATTICHE

    Il corso si compone di 20 lezioni frontali e di 8 esercitazioni di laboratorio.

     

    PROGRAMMA/CONTENUTO

     

    Programma contenuto

    Lezione 1: Introduzione alle tecniche del DNA ricombinante: cenni storici, metodologie

    Lezione 2: Enzimi di restrizione e legatura del DNA

    Lezione 3: Vettori e plasmidi

    Lezione 4: Clonaggio in E. coli e applicazioni plasmidi in eucarioti

    Lezione 5: Proteine ricombinanti in procarioti

    Lezione 6: Proteine ricombinanti in lievito e problemi nella produzione di proteine ricombinanti

    Lezione 7: Proteine ricombinanti in cellule animali

    Lezione 8: librerie geniche, sonde molecolari

    Lezione 9: elettroforesi del DNA e tecniche di rivelazione 

    Lezione 10: southern blot, real time PCR multiplex, micro array

    Lezione 11: La PCR, progettazione ed esecuzione. Individuazione di possibili difficoltà e punti critici.

    Lezione 12: Usi della PCR nelle tecniche di clonazione molecolare, casi particolari di PCR

    Lezione 13: Sequenziamento degli acidi nucleici, principi e principali tecniche in uso.

    Lezione 14: Studi di interazione proteina:proteina; principali tecniche in uso.

    Lezione 15: La GFP come reporter. Descrizione dei principali campi di utilizzo.

    Lezione 16: Principali geni reporter e tecniche di transfezione.

    Lezione 17: Tecniche di DNA Profiling e analisi del DNA in contesto forense

    Lezione 18: DNA Barcoding e suoi utilizzi

    Lezione 19: Metodi di sequenziamento massivo parallelo (NGS)

    Lezione 20: Analisi del DNA in paleogenetica e archeogenetica

    TESTI/BIBLIOGRAFIA

    Appunti di Tecnologie Ricombinanti. Aldo Pagano. Versione digitale gratuita sul sito del corso di studi

     

    “Biotecnologie Molecolari”, Terry Brown, Ed. Zanichelli; Dispense “Appunti di Tecnologie Ricombinanti”, Aldo Pagano, Disponibili su www.biotecnologie.unige.it.; “DNA ricombinante – geni e genomi”, Watson JD

    DOCENTI E COMMISSIONI

    Commissione d'esame

    ALDO PAGANO (Presidente)

    SONIA SCARFI' (Presidente)

    IRENE APPOLLONI

    LEZIONI

    INIZIO LEZIONI

    Ottobre 2018

    Orari delle lezioni

    L'orario di tutti gli insegnamenti è consultabile su EasyAcademy.

    ESAMI

    MODALITA' D'ESAME

    test scritto a scelta multipla e colloquio orale

    MODALITA' DI ACCERTAMENTO

    l’esame scritto valuterà la capacità di risolvere problemi di ingegneria genetica e progettazione di reazioni utili. l’esame orale permetterà di verificare la capacità di valutare le tecniche appropriate da utilizzarsi nei casi specifici.  I parametri valutati saranno la qualità dell’esposizione, l’utilizzo corretto del lessico specialistico, la capacità di ragionamento critico sullo studio realizzato.